4-12% Tris SwePAGE Pre-Cast Gel (11-vodnjak)

 

Servicebio SwePAGE Pre-cast Gel je poliakrilamidni gel majhne velikosti, pripravljen za uporabo, ki nudi udobje in hitro uporabo. Vnaprej ulita gelna plošča SwePAGE ima edinstven dizajn s posebno površinsko obdelavo, ki izboljša ločljivost beljakovinskih pasov, kar ima za posledico bolj enakomerno porazdelitev trakov. Gel v tem izdelku temelji na sistemu Tris in je združljiv s standardnim pufrom za elektroforezo Tris-glycine SDS-PAGE in pufrom za hitro elektroforezo visoke ločljivosti Tris-glycine SDS-PAGE SWE. Ta izdelek vključuje dve vrečki pufra za hitro elektroforezo visoke ločljivosti Tris-glycine SDS-PAGE SWE (prašek G2081-1L).

Pufer za hitro elektroforezo visoke ločljivosti SWE se ponaša z večjo zmogljivostjo pufra in višjo ločljivostjo ter ustvarja ostrejše in jasnejše beljakovinske pasove.

Ta izdelek ne vsebuje SDS in se lahko uporablja tudi za naravno elektroforezo z ustreznimi pufri za elektroforezo in ustreznimi reagenti.

V primerjavi s tradicionalno pripravljenimi geli v laboratorijih, SwePAGE pre-cast gel ponuja naslednje prednosti.

Enostavna uporaba:Pripravljen za uporabo, odpravlja potrebo po pripravi gela in stiku s strupenimi reagenti, kot je monomerni akrilamid.

Visoka zmogljivost nalaganja vzorcev:Največja zmogljivost nalaganja vzorca do 40 μL.

Visoka ločljivost:Formulacija gela je optimizirana za sistem Tris, kar zagotavlja višjo ločljivost in ostrejše beljakovinske pasove.

Odlična združljivost:Združljiv z večino majhnih vertikalnih sistemov za elektroforezo v proteinskem gelu (npr. Servicebio, Liuyi, Bio-Rad, Tanon itd.).

SwePAGE Pre-Mere lite gel plošče:Širina 100 mm, Višina 82 mm; Mere gela: širina 85 mm, višina 60 mm, debelina 1,0 mm. Različne koncentracije izokratičnih gelov, vključno z 8 %, 10 % in 12 %, so na voljo za ločevanje proteinov različnih molekulskih mas. Poleg tega so na voljo trije tipi gradientnih gelov, in sicer 4-20%, 4-12% in 8-16%, ki izpolnjujejo potrebe po ločevanju beljakovin znotraj različnih razponov molekulske mase.

 

 

Pošilja se z mokrim ledom; shranjujte pri 2-8 stopinjah z rokom uporabnosti 12 mesecev.

 

 

1. Raztopite pufer za elektroforezo, ki je priložen kompletu (tris-glicinski pufer za hitro elektroforezo visoke ločljivosti SDS-PAGE SWE (G2081) v čisti vodi in prilagodite prostornino na 1 L za uporabo. Odstranite gotov gel SwePAGE iz embalaže in odlepite lepilni trak na dnu plošče z gelom, kot je prikazano na sliki 1.

Slika 1: Odlepite trak na dnu plošče z gelom.

 

2. Nežno potisnite glavnike iz plošče z gelom in pazite, da je pritisk na obeh straneh čim bolj enakomeren (glejte sliko 2). Ploščo z gelom postavite v aparat za gelsko elektroforezo.

(Slika 2). Potisnite glavnik iz plošče z gelom

 

3. Priprava pred izvedbo elektroforeze z montažnim gelom: Če vzamemo za primer opremo za navpično elektroforezo Servicebio (SVE-2), sta dve tesnilni silikonski tesnili opremljeni z opremo, in sicer dvignjen del (slika 3A) in ravni del (slika 3D). Prvotno tesnilo je na splošno dvignjen del, ki ima na vrhu štrlečo strukturo. Vendar ima kratka plošča montažnega gela SwePAGE konkavno strukturo in ta del je raven. Zato je treba pred elektroforezo tesnilna silikonska tesnila v posodi za elektroforezo s štrlečo strukturo odstraniti in obrniti, tako da je ravna stran obrnjena navzven, ali jih neposredno zamenjati z ravnimi deli, da preprečite uhajanje elektrolitske tekočine. Posebni koraki so naslednji: odstranite tesnilno tesnilo v obliki črke U v rezervoarju za elektroforezo (sliki 3A, B), obrnite tesnilno tesnilo tako, da je ravna stran obrnjena navzven (slika 3C) ali ga zamenjajte z ravnim delom (slika 3D), in ga znova vstavite v utor v okvirju, kot je prikazano na sliki 3, če uporabljate rezervoar za elektroforezo znamke Liuyi, lahko zgornje korake prezrt. Po zaključku zgornjih korakov postavite montažno ploščo z gelom v aparat za gelsko elektroforezo.

Slika 3: Obračanje tesnilnih tesnil v napravi za elektroforezo, menjava tesnilnih tesnil.

 

Opomba: Ko nalagate plastično ploščo, se prepričajte, da je krajši rob obrnjen navznoter. Če uporabljate samo en montažni gel, vstavite distančnik na drugi strani, da preprečite uhajanje elektrolita. Ta primer prikazuje postopek obračanja dvignjenega tesnilnega tesnila v našem aparatu za elektroforezo, ki smo ga sami razvili. Če ni dvignjene površine, lahko ta korak preskočite.

4. V notranji rezervoar posode za elektroforezo nalijte dovolj 1 × SWE pufra za hitro elektroforezo z visoko ločljivostjo ali tris-glicinskega standardnega pufra za elektroforezo, da ga napolnite, in dodajte isti pufer za elektroforezo v zunanji rezervoar, tako da priporočena raven tekočine doseže sredina zunanjega rezervoarja Upoštevajte, da je treba za najboljše rezultate pufer v zunanjem rezervoarju dodati na nivo, ki je nižji od nivoja tekočine v notranjem rezervoarju, in ga ne prelijte plošče z gelom (Opomba: pufra za elektroforezo MOPS in MES nista združljiva s sistemom gela Tris predhodno ulitega gela SwePAGE. Uporabite pufer za elektroforezo s tris-glicinom).

 

5. Z brizgo ali pipeto aspirirajte ustrezno količino pufra za elektroforezo in nežno sperite vdolbinice za vzorec, da odstranite mehurčke in preostalo tekočino. 6. Priprava vzorca

(1) Gelska elektroforeza SDS-PAGE: Zmešajte vzorec proteina s 5× SDS-PAGE pufrom za nalaganje beljakovin (priporočeno G2013, G2075) v volumskem razmerju 4:1, nato inkubirajte pri 100 stopinjah 3-5 minut z uporabo kovinsko kopel ali kopel z vrelo vodo pred uporabo za opazovanje z elektroforezo. Veljavna skupna količina beljakovin je 1-100 ug.

(2) Naravna PAGE elektroforeza: Vzorec beljakovin zmešajte s 5× pufrom za nalaganje beljakovin brez SDS (priporočeno G2034) v volumskem razmerju 4:1. Ne segrevajte; dobro premešajte in takoj uporabite za pikanje z elektroforezo. Opomba: Pufer za elektroforezo, ki je priložen v kompletu z že pripravljenim gelom, vsebuje SDS, ki ni primeren za naravno elektroforezo.

 

7. Nalaganje vzorca in elektroforeza: Ko nalagate vzorec, vstavite konico pipete navpično v vdolbino za vzorec. Pazite, da ne preluknjate gela ali deformirate matrice gela, saj lahko to povzroči puščanje vzorca. Po končanem nalaganju vzorca pokrijte posodo za elektroforezo s pokrovom in vstavite napajalni kabel v vtičnico aparata za elektroforezo (rdeča proti rdeči, črna proti črni). Izvajajte elektroforezo pri napetosti 200 V 25-45 minut ali dokler fronta bromofenol modrega barvila ne doseže dna gela. Opomba: Prilagodite napetost elektroforeze glede na specifičnost

pogoje vašega poskusa. Nekateri aparati za elektroforezo slabo odvajajo toploto na dnu in uporaba previsoke napetosti lahko povzroči lokalno pregrevanje, kar vpliva na rezultate elektroforeze. V takšnih primerih je potrebno napetost ustrezno zmanjšati in elektroforezo izvajati v ledeni kopeli. Spodnja tabela vsebuje nekaj referenčnih podatkov.

 

Pufer za elektroforezo	Napetost	Začetni tok	Končni tok	Čas elektroforeze
MOPS	200 V	{0} mA	105 mA	20-30 min
MES	200 V	{0} mA	79 mA	30-40 min

 

8. Po končani elektroforezi odstranite montažni gel iz rezervoarja za elektroforezo. Previdno vstavite prijemalno orodje v režo med ploščama z gelom (kot je prikazano z rdečim poljem na sliki 4) in nežno odprite plastične plošče od zgoraj navzdol, dokler se popolnoma ne ločita. Gel se lahko pritrdi na obe strani gel plošč. Odstranite ploščo brez gela, ploščo z gelom pa stran z gelom pod kotom potopite v vodo in jo nežno dvignite. Ko gel pade v vodo, ga odstranite iz vode za barvanje ali kasnejše postopke prenosa. Opomba: uporabljene gelne plošče in glavnik zavrzite med medicinske ali laboratorijske odpadke. Ne odlagajte jih v običajne gospodinjske smetnjake.

Slika 4: Odprite plošče z gelom (na primer na eni strani ponovite ta korak za drugo stran)

 

kat.št.	G2302-10	G2306-10
Ime	10% Tris SwePAGE Predoddaja Gel	4%-12% Tris SwePAGE Pre-Cast Gel
spec.	10 kosov/škatlo	10 kosov/škatlo
Priporočeno območje ločevanja	{0} kDa	{0} kDa
Veljavni sistem elektroforeze	Tris-Glicin	Tris-Glicin
Največja prostornina nalaganja vzorca (μL)	40	40
Vzorčne vrtine	11	11
Koncentracija gela	0.1	4-12%

 

 

Priljubljena oznake: 4-12% tris swepage pre-cast gel (11-well), Kitajska 4-12% tris swepage pre-cast gel (11-well) proizvajalci, dobavitelji, tovarna